治疗晚期弥漫大 B 细胞淋巴瘤。世界临床病例杂志》刊登 ANK 治疗结果淋巴细胞库为ANK免疫细胞疗法提供培养中心

2023.10.26 09:30

リンパ球バンク株式会社

世界临床病例杂志》（WJCC）发表了一篇关于ANK自体淋巴细胞免疫疗法（以下简称ANK免疫细胞疗法）治疗晚期弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的病例报告。

该病例报告由宫崎县惠比诺市惠比诺中心医院（Ebino Centro Clinic）院长、医学博士 Kenjiro Nagai 博士及其同事利用 ANK Company Inc.（总部：东京都品川区；总裁兼首席执行官：Kotaro Harada）运营的细胞培养中心发表，该中心促进了 ANK 免疫细胞疗法的推广。

DLBCL 的预后很差，五年生存率约为 50%。ANK 免疫细胞疗法通过增殖和激活自然杀伤（NK）细胞，只攻击恶性肿瘤。由于 ANK 细胞攻击 PD-L1 阳性的肿瘤细胞，因此 ANK 免疫细胞疗法不仅对成人 T 细胞白血病（ATL由于 ANK 细胞会攻击 PD-L1 阳性的肿瘤细胞，因此 ANK 免疫细胞疗法不仅对成人 T 细胞白血病（ATL）有效，对恶性淋巴瘤也同样有效。

论文。

永井健二郎、永井茜、大久保祐司、手川圭辅

世界临床病例杂志 2023 年 10 月 26 日；11(30): 0-0

DOI: 10.12998/wjcc.v11.i30.0000

病例报告。

单用扩增自然杀伤疗法成功治疗弥漫大 B 细胞淋巴瘤：病例报告

我们在此报告一例单用扩增自然杀伤细胞免疫疗法成功治疗晚期弥漫性大 B 细胞淋巴瘤的老年患者的病例。患者是一名 91 岁的女性，于 2022 年 4 月因主诉右侧腋窝淋巴结突然肿大而就诊。由于没有脾脏受累或对侧淋巴结肿大，患者被诊断为II期；作为ANK疗法，患者于2022年7月28日进行了淋巴细胞分离采集，以培养6次输注。为降低不良反应的发生率，将培养后的正常体积对半分开，共获得 12 个剂量的培养细胞。培养的 NK 细胞每周输注两次。每隔一到两个月进行一次计算机断层扫描和血清学检测，以评估疗效。治疗抑制了病灶的生长，抗肿瘤效果持续了几个月。患者的不良反应轻微；PD-L1免疫染色呈阳性，表明治疗效果显著。

ANK疗法可作为恶性淋巴瘤的一线疗法；PD-L1阳性率可被视为疗效的预测指标。

(永井健二郎博士，医学博士，惠比诺中心诊所医疗公司主任）

什么是 ATL "成人 T 细胞白血病"？

ATL "成人 T 细胞白血病 "发生在百分之几终生感染 HTLV-1 病毒的人身上。这种疾病对抗癌药物的反应较小，即使有反应，也会立即复发，侵袭性 ATL 的预期寿命中位数为 13 个月。即使是症状反复进展和改善的病例，如烟熏型，疾病最终也会转为急性，急性转化后的中位预期寿命一般为一年左右。有时会进行骨髓移植，但由于严重的副作用，老年人无法接受治疗。另一方面，大多数患者都是老年人。这是一种高度难治性疾病，没有既定的治疗标准，也没有在病情严重之前不积极治疗的指导方针。莫加单抗已被批准用于治疗 ATL，但会产生严重的副作用。在这方面，研究报告指出，ANK 免疫细胞疗法对治疗 ATL 很有效，而且没有强烈的副作用（不良反应），即使是老年患者也是如此，尽管可能会出现一过性发热和其他症状，这对患者和病毒携带者来说是个好消息。

为什么说免疫细胞疗法无法治疗白血病？

一般认为，免疫细胞疗法不能治疗白血病。原因是在白血病的病例中，从血液中提取免疫细胞进行培养时会混入癌细胞。这是因为受污染的癌细胞在培养过程中会生长，将它们送回病人体内会出现问题。在清除污染的癌细胞后，或在药物治疗（如莫甘珠单抗）缓解后，为研究目的培养免疫细胞。此外，还有已获批准的 CAR-T 疗法，即在清除污染的癌细胞后培养免疫细胞，但除了 ANK 免疫细胞疗法外，还没有其他免疫细胞疗法可以在不进行预处理的情况下治疗白血病，达到临床实用水平。

如果血液中的癌细胞数量过多，就无法培养 ANK 免疫细胞疗法，但如果血液中的癌细胞数量低于一定水平，另一篇论文报道，培养的 ATL 细胞可减少到 PCR 检测无法检测到的水平。

Teshigawara K, Nagai S, Bai G, Okubo Y, Chagan-Yasutan H, Hattori T. MDPI Reports 1(2):13, 2018. doi.10.3390/reports1020013

病例报告。

为一名处于急性危机期的烟雾型成人T细胞白血病患者成功实施扩增天然杀伤细胞（ANK）疗法

ANK 自体淋巴细胞免疫疗法（ANK 免疫细胞疗法）

在用于成分血采样等的设备中，对患者自身的 5 至 8 升血液进行体外循环，然后筛选和提取血液中的淋巴细胞。血液中的 NK 细胞高度活化，同时选择性增殖。高度活化的 NK 细胞在细胞分裂过程中炸弹爆炸时有自毁倾向，因为它们在细胞内有大量类似炸弹的内质网体，可以伤害癌细胞。

因此，在临床实践中很难同时达到有意义的激活和增殖水平，但京都大学的两位研究人员克服了这一困难，并将这种疗法命名为 "Amplified NK (ANK)"，意思是既有活性又有增殖。一位患者通过这种疗法战胜了晚期癌症，研究人员于 2001 年成立了淋巴细胞库有限公司。

在治疗过程中，培养的 ANK 细胞通过静脉注射回输体内。除了在不改变以攻击癌细胞为主要任务的 NK 细胞功能的情况下直接破坏癌细胞外，该疗法还通过释放大量免疫刺激剂来刺激体内 NK 细胞的活化。此时释放的免疫刺激剂大多具有诱发发热的特性，因此输液后可能会一过性出现寒战、高热等不良反应。

用免疫细胞培养法进行 FCM 分类

根据 FCM 分类与一般方法的比较

免疫细胞疗法的背景和特点

20 世纪 70 年代，人们已经知道 T 细胞、树突状细胞、巨噬细胞等。为了寻找更有效的细胞，人们发现了一些淋巴细胞，它们一旦活跃起来，就会立即攻击遇到的任何癌细胞，并将其命名为自然杀伤（NK）细胞。人们发现了 NK 细胞在肿瘤免疫中的重要作用，它拥有大量能够识别癌细胞的特殊传感器，攻击力强大，而且体内 NK 细胞的数量高达 1000 亿个。如今，人们已经知道，癌症患者体内的 NK 细胞活性降低，使癌细胞得以增殖。

美国国立卫生研究院（NIH）曾进行过一次大规模的免疫细胞疗法临床试验，从数十升血液中提取 NK 细胞，对其进行强刺激后再放回患者体内，结果显示对几百名抗癌药物无效的癌症患者有一定效果。培养时间仅限于三天，因为如果培养时间超过三天，高活性 NK 细胞在增殖过程中更容易自毁。此外，将大量活化的 NK 细胞送回体内会导致大型肿瘤坏死，在肿瘤内释放出大量钾和其他物质，有可能引起心脏骤停和其他问题。因此，在进行治疗时需要占用重症监护室并控制体液，这不切实际，成本高昂，也无法付诸实践。

NK 细胞极难培养，只有提高其活性才能发挥作用，但一旦开始增殖，就容易因其强大的攻击性而自毁。京都大学的两位研究人员开发出了 ANK 自体淋巴细胞免疫疗法（ANK 免疫细胞疗法），它能同时激活和增殖 NK 细胞，超越了美国方法的局限性，经过小规模临床试验后已开始普遍应用。由于它优于 NIH 方法，如果将大肿瘤一次性放回体内，有可能导致肿瘤坏死。因此，将培养好的细胞冷冻保存，分成 12 个疗程，解冻后重新培养，原则上每周两次分次给药，这样既保证了安全性，又可以在门诊进行治疗。不过，在本文介绍的病例中，由于考虑到患者的病情等因素，将治疗剂量分为正常剂量的一半，因此每次给药的细胞数量是标准剂量的一半。

比较每种治疗方法培养的细胞毒活性。